梅(mei)裏(li)埃(ai)API細(xi)菌(jun)鑒(jian)定試(shi)劑盒(he)使用(yong)操作方法(fa)

梅裏(li)埃(ai)API試(shi)劑盒(he)細菌(jun)鑒(jian)定試(shi)劑盒(he)種類如(ru)下：

（註）：每(mei)種試(shi)劑盒(he)都需要相(xiang)關(guan)配(pei)套(tao)試(shi)劑才能使(shi)用(yong)。

梅裏(li)埃(ai)API細(xi)菌(jun)鑒(jian)定試(shi)劑盒(he)使用(yong)操作方法(fa)：

例(li)：腸(chang)桿(gan)菌和其(qi)他非苛養(yang)革蘭氏陰(yin)性(xing)桿(gan)菌鑒(jian)定試(shi)劑盒(he)（比色(se)法(fa)）

【預期(qi)用(yong)途(tu)】
該產品(pin)用於腸桿(gan)菌和其(qi)它(ta)非(fei)苛養(yang)革蘭氏陰(yin)性(xing)桿(gan)菌的(de)鑒(jian)定。
該產品(pin)用於可(ke)導致腹瀉(xie)、血(xue)流(liu)感染、尿路(lu)感(gan)染等的(de)腸桿(gan)菌和其(qi)它(ta)非(fei)苛養(yang)革蘭氏陰(yin)性(xing)桿(gan)菌的(de)鑒(jian)定，臨床(chuang)常(chang)見樣(yang)本來源(yuan)有(you)糞(fen)便(bian)、直(zhi)腸(chang)拭(shi)子、尿、血等(deng)。
【檢驗原理(li)】
API 20 E 試(shi)條由 20 個含幹(gan)燥(zao)底(di)物的(de)微量(liang)小(xiao)管(guan)組成。將(jiang)菌懸(xuan)液接(jie)種到管(guan)內，使小(xiao)管(guan)內底(di)物溶(rong)解。孵(fu)育(yu)過(guo)程中(zhong)，所(suo)產生(sheng)的(de)代(dai)謝產(chan)物(wu)通(tong)過(guo)自(zi)發反應或加入附(fu)加(jia)試(shi)劑後而(er)變(bian)色(se)。鑒(jian)定結(jie)果可(ke)根(gen)據說明(ming)書的(de)判讀(du)表進(jin)行讀出，也(ye)可(ke)參(can)照(zhao)生(sheng)化(hua)譜檢索(suo)手冊或鑒(jian)定軟(ruan)件(jian)，得(de)到鑒(jian)定結(jie)果。
【主要組成成分】
試(shi)劑盒(he)組成（用於(yu) 25 個敏(min)感(gan)性(xing)測試(shi)）
- 25 個 API 20 E 試(shi)條
- 25 個孵(fu)育(yu)盒(he)
- 25 張(zhang)結(jie)果報告(gao)單
- 1 個封口(kou)夾(jia)
試(shi)劑盒(he)組成（用於(yu) 100 個敏(min)感(gan)性(xing)測試(shi)）
- 100 個 API 20 E 試(shi)條（4x25 試(shi)條）
- 100 個孵(fu)育(yu)盒(he)
- 100 張(zhang)結(jie)果報告(gao)單
- 1 個封口(kou)夾(jia)
試(shi)劑條成分

API 20 E 試(shi)條的(de)成分請參(can)閱(yue)說明(ming)書後的(de)結(jie)果判讀(du)表。

【檢(jian)驗(yan)方(fang)法(fa)】
氧(yang)化(hua)酶(mei)試(shi)驗：
必須按(an)照(zhao)制造商的(de)使用(yong)說明(ming)進(jin)行氧化(hua)酶(mei)試(shi)驗。由於它(ta)是(shi)最終(zhong)圖(tu)譜的(de)組成部分，請將(jiang)其(qi)結(jie)果記(ji)錄(lu)於報(bao)告(gao)單上（第(di)二(er)十壹個試(shi)驗）。
試(shi)條的(de)準備：
1.準備壹個培養(yang)盒(he)（盤和(he)蓋(gai)子），倒入約 5mL 蒸餾(liu)水(shui)或(huo)軟(ruan)化(hua)水(shui)【或(huo)其(qi)它(ta)不(bu)含添(tian)加劑或不(bu)含有(you)能產(chan)生(sheng)揮發性(xing)氣(qi)體（如(ru) Cl2, CO2,等）的(de)化(hua)學(xue)物(wu)質的(de)水】於(yu)盤(pan)的(de)蜂窩(wo)小(xiao)凹中(zhong)，造(zao)成壹個濕室。
2.在盤(pan)的(de)長邊寫上(shang)菌(jun)株(zhu)號(不(bu)要寫在(zai)蓋(gai)上，因(yin)為(wei)操(cao)作(zuo)過(guo)程中(zhong)很容(rong)易(yi)將(jiang)蓋(gai)子放到(dao)其(qi)它(ta)試(shi)條上(shang)）
3.從包(bao)裝(zhuang)中取出試(shi)條。

4.將(jiang)試(shi)條置(zhi)於培養(yang)盒(he)中。
註意：API 20 E 只(zhi)能用(yong)於腸(chang)道(dao)細菌(jun)和或非(fei)苛養(yang)的(de)革蘭陰(yin)性(xing)桿(gan)菌。苛養(yang)菌由於對營養(yang)有特殊要求並(bing)且需要合適(shi)的(de)防(fang)護(hu)措(cuo)施(例如(ru)布(bu)魯(lu)氏(shi)菌(jun)屬 Brucella 和(he)法(fa)朗(lang)西(xi)絲菌(jun)屬 Francisella)，這些菌沒(mei)有(you)包(bao)括(kuo)在(zai) API 20 E 數據庫中。 必須采(cai)用(yong)其(qi)它(ta)方(fang)法(fa)，來(lai)排(pai)除(chu)或(huo)確認這(zhe)些菌的(de)存(cun)在。
接種物的(de)準備
 根(gen)據“警(jing)告(gao)及(ji)註意"壹欄(lan)所(suo)列(lie)方法(fa)打(da)開(kai)壹安(an)瓿 API 0.85% NaCl 培養(yang)基（5mL)或壹安(an)瓿 API 懸(xuan)浮(fu)培養(yang)(5mL), 或用含 5mL 0.85 NaCl 鹽(yan)水(shui)或不(bu)含添(tian)加劑的(de)無菌(jun)蒸(zheng)餾水(shui)。
 用(yong)吸管(guan)或(huo) PSIpette 從分離(li)平(ping)板上挑(tiao)取單個分純(chun)菌(jun)落至懸(xuan)浮(fu)基(ji)物(wu)中。建(jian)議使用新(xin)鮮(xian)培養(yang)物（18-24小(xiao)時(shi)）。 仔細(xi)研(yan)勻以(yi)達到(dao)均壹的(de)細菌(jun)懸(xuan)液。
制備好的(de)菌懸(xuan)液必須立(li)即使用。
註意：大(da)多數弧(hu)菌(jun)（Vibrio)均嗜(shi)鹽(yan)，如(ru)懷(huai)疑(yi)菌株(zhu)為(wei)弧(hu)菌(jun)，請使(shi)用(yong) 0.85% NaCl (5mL)培養(yang)基。
試(shi)條的(de)接種
 用同壹根(gen)吸管(guan)，將(jiang)菌懸(xuan)液加(jia)入到試(shi)條的(de)小(xiao)管(guan)內。為(wei)避(bi)免在(zai)小(xiao)管(guan)的(de)基底(di)部形(xing)成氣(qi)泡，請將(jiang)試(shi)條輕微向前
傾斜並(bing)把吸管(guan)或(huo)者(zhe) PSI 管(guan)緊靠小(xiao)杯(bei)邊緣加入菌(jun)液(ye)）：
- CIT、VP 和(he) GEL 小(xiao)管(guan)，菌(jun)液(ye)需充滿(man)的(de)管部(bu)和(he)杯部(bu)。
- 其(qi)它(ta)管(guan)僅(jin)充滿(man)管(guan)部(bu)(不(bu)是(shi)杯部(bu))。
- 在(zai)試(shi)驗 ADH, LDC, ODC, H2S 和(he) URE 小(xiao)杯(bei)內加入礦物(wu)油(you)以(yi)形(xing)成厭氧(yang)環境。
 蓋(gai)上培養(yang)盒(he)。於 36℃±2℃孵(fu)育(yu) 18~24 小(xiao)時(shi)。
【陽(yang)性(xing)判斷(duan)值】
請參(can)考(kao)本說明(ming)書後的(de)“反應鑒(jian)定表(biao)"，表(biao)中列(lie)出了(le)各種生(sheng)化(hua)反應預期(qi)結(jie)果範(fan)圍。
【檢(jian)驗(yan)結(jie)果的(de)解釋(shi)】
試(shi)條的(de)判讀(du)
 孵(fu)育(yu)後，根(gen)據判讀(du)表表(biao)判讀(du)各反應結(jie)果。
 如(ru)果 3 個或 3 個以(yi)上(shang)測定（GLU 試(shi)驗+或(huo)-)為(wei)陽(yang)性(xing)結(jie)果，記(ji)錄(lu)所(suo)有自(zi)發反應於結(jie)果報告(gao)單上並(bing)觀察(cha)需要

附(fu)加(jia)試(shi)劑的(de)試(shi)驗的(de)結(jie)果：
- TDA 試(shi)驗：加(jia) 1 滴 TDA 試(shi)劑。深褐色(se)為(wei)陽(yang)性(xing)反應，記(ji)錄(lu)於報(bao)告(gao)單上。
- IND 試(shi)驗：加(jia) 1 滴 JAMES 試(shi)劑。整(zheng)個反應管出現(xian)粉紅(hong)色(se)者(zhe)為(wei)陽(yang)性(xing)，記(ji)錄(lu)於報(bao)告(gao)單上。
- VP 試(shi)驗：加(jia) 1 滴 VP 1 和(he) 1 滴 VP 2 試(shi)劑。至少(shao)等(deng)待 10 分鐘(zhong)，出現(xian)粉紅(hong)或紅(hong)色(se)者(zhe)表(biao)明(ming)為(wei)陽(yang)性(xing)結(jie)果，記(ji)錄(lu)於報(bao)告(gao)單上。如(ru)淺粉紅(hong)色(se)在(zai) 10 至 12 分鐘(zhong)內出現(xian)，判斷(duan)結(jie)果為(wei)陰(yin)性(xing)。
註意：吲(yin)哚產生(sheng)試(shi)驗必須最(zui)後進(jin)行，因(yin)為(wei)該反應釋(shi)放的(de)氣(qi)體產(chan)物(wu)會(hui)千(qian)擾試(shi)條的(de)其(qi)他試(shi)驗。在(zai)加入(ru)附(fu)加(jia)試(shi)劑後，請小(xiao)心(xin)勿(wu)調換培養(yang)盒(he)蓋(gai)。
 如(ru)果加入附(fu)加(jia)試(shi)劑前陽性(xing)結(jie)果（包(bao)括(kuo) GLU 試(shi)驗）的(de)數量(liang)少於 3 個：
- 重新(xin)培養(yang) 24 小(xiao)時(shi)（土(tu) 2 小(xiao)時(shi)），且不(bu)要加(jia)任(ren)何試(shi)劑。
- 重新(xin)進(jin)行需要加(jia)入(ru)附(fu)加(jia)試(shi)劑的(de)試(shi)驗（如(ru)前說明(ming)）。
- 為(wei)了(le)完成鑒(jian)定，可(ke)能(neng)需要進(jin)行補(bu)充試(shi)驗（參(can)考(kao)有(you)關(guan)鑒(jian)定的(de)段落）。