梅裏埃VITEK在微(wei)量(liang)生(sheng)化鑒定(ding)系統(tong)中的(de)應(ying)用(yong)

　　梅裏埃VITEK采(cai)用(yong)傳(chuan)統(tong)的(de)比色(se)法(fa)和快(kuai)速熒光法。根據不同類別(bie)細菌的(de)理(li)化性(xing)質(zhi)不(bu)同，設計(ji)不同的(de)測試(shi)卡，每(mei)壹(yi)張(zhang)卡包(bao)括(kuo)多(duo)項生(sheng)化反應(ying)。儀器采(cai)用(yong)光電比色(se)法(fa)測定(ding)細菌因(yin)分(fen)解(jie)底物(wu)導致(zhi)PH值改(gai)變(bian)或由於細菌生(sheng)長(chang)利(li)用(yong)底物(wu)而(er)引(yin)起(qi)的(de)透(tou)光度變(bian)化；其(qi)熒光法是在測試(shi)卡的(de)小孔中加入(ru)酶(mei)底物(wu)，使(shi)其(qi)與細菌產(chan)生(sheng)的(de)酶(mei)結(jie)合(he)生(sheng)成熒(ying)光物(wu)質(zhi)。

 

　　細菌鑒(jian)定(ding)實驗底物(wu)有(you)幾種不(bu)同類型(xing)，各個(ge)不同品(pin)牌的(de)儀器均使(shi)用(yong)自(zi)己的(de)測試(shi)卡和(he)相應(ying)的(de)試(shi)劑；以酶(mei)為(wei)基(ji)礎(chu)的(de)反(fan)應(ying)底物(wu)，包(bao)括(kuo)顯(xian)色底物(wu)和(he)熒(ying)光底物(wu)；以微(wei)生(sheng)物(wu)生(sheng)長(chang)為(wei)基(ji)礎(chu)的(de)底物(wu)是糖類(lei)底物(wu)和(he)化合物(wu)底物(wu)，還(hai)有(you)混(hun)合底物(wu)。

 

　　梅裏埃VITEK通過與(yu)各(ge)種(zhong)細菌發生(sheng)氧化、降解(jie)及水解(jie)反應(ying)，產(chan)生(sheng)顏(yan)色的(de)變(bian)化或產(chan)生(sheng)熒光物(wu)質(zhi)，利(li)用(yong)顯色(se)和熒(ying)光強度(du)的(de)變(bian)化。來鑒定(ding)細菌的(de)菌(jun)型(xing)。儀器會自(zi)動選擇(ze)底物(wu)進(jin)行(xing)分(fen)析(xi)。

 

　　DNA測序進(jin)行(xing)菌(jun)種(zhong)鑒(jian)定(ding)的(de)結(jie)果(guo)比傳(chuan)統(tong)生(sheng)化鑒定(ding)更(geng)為直(zhi)接，鑒(jian)定(ding)結(jie)果(guo)也更(geng)為可靠。測序不(bu)依賴菌(jun)種(zhong)本(ben)身(shen)特(te)點(dian)，對所(suo)有(you)菌種均可使用(yong)。對於細菌，對16SrRNA進(jin)行(xing)分(fen)析(xi)鑒定(ding)，對於真(zhen)菌，對其(qi)ITS基因(yin)進行(xing)測序分(fen)析(xi)。利用(yong)特定(ding)引(yin)物(wu)PCR擴(kuo)增(zeng)未(wei)知(zhi)菌(jun)株的(de)16SrRNA基(ji)因(yin)或者ITS區，並(bing)進行(xing)DNA測序，與(yu)GenBank中的(de)已知(zhi)序列進(jin)行(xing)同源性(xing)比較後，判(pan)定(ding)細菌種(zhong)類，將細菌劃(hua)分(fen)到屬或種(zhong)。

 

　　微(wei)量(liang)生(sheng)化鑒定(ding)系統(tong)，是在傳(chuan)統(tong)生(sheng)化試(shi)驗的(de)基(ji)礎(chu)上(shang)加以改(gai)進，將原(yuan)先(xian)用(yong)試(shi)管進(jin)行(xing)的(de)系列生(sheng)化反應(ying)，壓(ya)縮整合到壹(yi)組(zu)含有(you)供不同生(sheng)化試(shi)驗用(yong)的(de)脫水底物(wu)的(de)小管組(zu)合的(de)裝置(zhi)內(nei)。試(shi)驗時(shi)將培(pei)養物(wu)制(zhi)成(cheng)菌(jun)懸液(ye)，分(fen)註於各(ge)個小管內(nei)，並(bing)在小管上(shang)加上礦物(wu)油(you)。然後，用(yong)適(shi)宜(yi)的(de)溫度(du)培(pei)養壹(yi)定(ding)時間(jian)。取出觀(guan)察各孔的(de)顏(yan)色變(bian)化（少(shao)數(shu)試(shi)驗須(xu)於滴(di)加試(shi)劑後判(pan)斷(duan)）。