梅(mei)裏埃 API20E腸桿菌(jun)和其他非(fei)苛(ke)養革(ge)蘭(lan)氏(shi)陰(yin)性(xing)桿菌(jun)鑒定(ding)試劑(ji)盒(he)說明(ming)書(shu)

腸(chang)桿菌(jun)和其他非(fei)苛(ke)養革(ge)蘭(lan)氏(shi)陰(yin)性(xing)桿菌(jun)鑒定(ding)試劑(ji)盒(he)（比(bi)色法(fa)）說明(ming)書(shu)

【產(chan)品名(ming)稱】 通(tong)用(yong)名(ming)稱：腸(chang)桿菌(jun)和其他非(fei)苛(ke)養革(ge)蘭(lan)氏(shi)陰(yin)性(xing)桿菌(jun)鑒定(ding)試劑(ji)盒(he)（比(bi)色法(fa)）

英(ying)文名(ming)稱：API 20 E

【包(bao)裝規(gui)格(ge)】 25 測(ce)試(shi)/盒(he)、100 測(ce)試(shi)/盒(he)。

【預期用(yong)途(tu)】 該(gai)產(chan)品(pin)用(yong)於腸桿(gan)菌(jun)和其它(ta)非(fei)苛(ke)養革(ge)蘭(lan)氏(shi)陰(yin)性(xing)桿菌(jun)的(de)鑒定(ding)。 該(gai)產(chan)品(pin)用(yong)於可導(dao)致腹瀉、血流感(gan)染、尿(niao)路(lu)感(gan)染(ran)等(deng)的(de)腸桿(gan)菌(jun)和其它(ta)非(fei)苛(ke)養革(ge)蘭(lan)氏(shi)陰(yin)性(xing)桿菌(jun)的(de)鑒定(ding)，臨床(chuang)常(chang) 見(jian)樣本來(lai)源(yuan)有(you)糞(fen)便、直(zhi)腸(chang)拭子、尿(niao)、血等(deng)。

【檢驗(yan)原理(li)】 API 20 E 試(shi)條由(you) 20 個(ge)含(han)幹(gan)燥(zao)底物的(de)微量(liang)小管組(zu)成。將(jiang)菌(jun)懸(xuan)液(ye)接種(zhong)到管內(nei)，使小管內(nei)底物溶解(jie)。孵育(yu)過(guo) 程(cheng)中，所(suo)產生的(de)代謝(xie)產物通(tong)過(guo)自發(fa)反應或加入附加試劑(ji)後(hou)而變(bian)色。鑒(jian)定(ding)結(jie)果(guo)可(ke)根(gen)據說明(ming)書(shu)的(de)判讀(du)表進(jin)行 讀(du)出，也可(ke)參照(zhao)生化(hua)譜(pu)檢索(suo)手(shou)冊(ce)或鑒定(ding)軟件，得到鑒定(ding)結(jie)果(guo)。

【主要組(zu)成成分(fen)】 

試(shi)劑(ji)盒(he)組(zu)成（用(yong)於 25 個(ge)敏(min)感性(xing)測(ce)試(shi)） 

- 25 個(ge) API 20 E 試(shi)條 

- 25 個(ge)孵育(yu)盒(he) 

- 25 張(zhang)結(jie)果(guo)報(bao)告單 

- 1 個(ge)封(feng)口夾 試(shi)劑(ji)盒(he)組(zu)成（用(yong)於 100 個(ge)敏(min)感性(xing)測(ce)試(shi)） 

- 100 個(ge) API 20 E 試(shi)條（4x25 試(shi)條） 

- 100 個(ge)孵育(yu)盒(he) - 100 張(zhang)結(jie)果(guo)報(bao)告單 

- 1 個(ge)封(feng)口夾 試(shi)劑(ji)條成分(fen) 

API 20 E 試(shi)條的(de)成分(fen)請參閱說明(ming)書(shu)後(hou)的(de)結(jie)果(guo)判(pan)讀(du)表。

需要但(dan)沒有(you)提(ti)供的(de)試劑(ji)和材(cai)料(liao) 

試(shi)劑(ji) 

- 0.85 % API NaCl 培養(yang)基(ji)，5 mL (Ref. 20 230)或(huo) API 懸(xuan)浮(fu)培養(yang)基(ji)，5 mL (Ref. 20 150)

- API 20 E 試(shi)劑(ji)盒(he)(Ref. 20 120)或(huo) 單(dan)個的(de)試劑(ji)：

TDA (Ref. 70 402) 

JAMES (Ref. 70 542) 

VP 1 + VP 2 (Ref. 70 422) 

NIT 1 +NIT 2 (Ref. 70 442) 

- Zn 試(shi)劑(ji)(Ref. 70 380)  

- 氧(yang)化(hua)酶(mei)（Ref. 55 635*)

*某(mou)些(xie)國家不銷售此產品(pin)：請使用(yong)相近(jin)的(de)試劑(ji)。 

- 礦物油（Ref. 70 100)

材(cai)料(liao)：

- 吸管或(huo) PSI 管(guan) 

- 安(an)瓿保護套(tao) 

- 安(an)瓿架(jia)

【儲(chu)存(cun)條件及有(you)效(xiao)期】 2~8°C 保(bao)存(cun)，有(you)效(xiao)期為 18 個(ge)月。

試(shi)條采(cai)用(yong)鋁袋包裝並(bing)附(fu)有(you)幹(gan)燥(zao)劑(ji)。有(you)效(xiao)期為 18 個(ge)月。

壹(yi)旦(dan)打(da)開(kai)鋁袋(*)，請使用(yong)封(feng)口夾(試(shi)劑(ji)盒(he)己含(han)有(you))重(zhong)新(xin)封(feng)口，以保證(zheng)試條的(de)幹(gan)燥(zao)：把(ba)鋁袋撕開(kai)處末(mo)端放(fang)入(ru) 打(da)開(kai)的(de)夾子並(bing)小心的(de)加緊(jin)兩(liang)端。開(kai)啟鋁袋後(hou)，在(zai) 2~8°C 環(huan)境並(bing)封(feng)好(hao)口的(de)環(huan)境下(xia)，試條可(ke)享有(you) 10 個(ge)月的(de) 有(you)效(xiao)期(或(huo)包裝(zhuang)盒(he)上(shang)的(de)有(you)效(xiao)期，以較(jiao)短(duan)時間為準)。

（*）建(jian)議(yi)開(kai)封(feng)的(de)方(fang)法(fa): 在(zai)封(feng)口下(xia)方(fang)剪(jian)開(kai)鋁箔裝(zhuang)，為防(fang)止意外損壞幹(gan)燥(zao)劑(ji)，開(kai)封(feng)時(shi)應保持(chi)鋁箔袋(dai)垂直(zhi)。 

生(sheng)產日期：詳見(jian)外(wai)包(bao)盒(he)標簽(qian)。 

有(you)效(xiao)期至(zhi)：詳見(jian)外(wai)包(bao)盒(he)標簽(qian)。

【適用(yong)儀(yi)器(qi)】 

- API 20 E 數(shu)值分(fen)析圖(tu)譜(pu)(Ref. 20 190)或(huo)鑒定(ding)軟件。 

- 微(wei)生物實驗(yan)室常(chang)規(gui)設(she)備

【樣本要求】 

API 20 E 不(bu)能直(zhi)接(jie)用(yong)於臨床(chuang)或(huo)其他標本(ben)（例(li)如血樣，尿(niao)樣和糞(fen)樣、直(zhi)腸(chang)拭子等(deng)等(deng)）。需要進(jin)行鑒(jian)定(ding)的(de)微 生(sheng)物必(bi)須(xu)首先(xian)根(gen)據標(biao)準(zhun)微生(sheng)物處理(li)技(ji)術於適合(he)腸桿(gan)菌(jun)和/或(huo)非(fei)苛(ke)養革(ge)蘭(lan)陰性(xing)桿菌(jun)生長(chang)的(de)培養(yang)基(ji)上(shang)分(fen)離(li)培 養(yang)。 

【檢驗(yan)方(fang)法(fa)】

氧(yang)化(hua)酶(mei)試驗(yan)： 必(bi)須(xu)按照(zhao)制(zhi)造(zao)商的(de)使用(yong)說明(ming)進(jin)行氧(yang)化(hua)酶(mei)試驗(yan)。由(you)於它(ta)是最(zui)終(zhong)圖(tu)譜(pu)的(de)組(zu)成部分(fen)，請將其結(jie)果(guo)記(ji)錄(lu)於報告單 上(shang)（第(di)二(er)十壹(yi)個(ge)試驗(yan)）。 

試(shi)條的(de)準備 

• 準(zhun)備壹(yi)個(ge)培養(yang)盒(he)（盤和蓋(gai)子），倒入(ru)約(yue) 5mL 蒸(zheng)餾(liu)水或(huo)軟化水

【或(huo)其它(ta)不(bu)含(han)添加劑(ji)或不(bu)含(han)有(you)能(neng)產生(sheng)揮發(fa) 性(xing)氣體(ti)（如 Cl2, CO2,等(deng)）的(de)化學(xue)物質的(de)水】於盤的(de)蜂(feng)窩(wo)小凹中(zhong)，造(zao)成壹(yi)個(ge)濕室。 

• 在(zai)盤(pan)的(de)長(chang)邊(bian)寫(xie)上(shang)菌(jun)株號(hao)(不(bu)要寫在(zai)蓋(gai)上(shang)，因(yin)為操(cao)作(zuo)過(guo)程(cheng)中很容(rong)易將蓋(gai)子放(fang)到其它(ta)試(shi)條上(shang)） 

• 從包(bao)裝(zhuang)中取(qu)出試條。

• 將(jiang)試條置(zhi)於培養(yang)盒(he)中。 註(zhu)意(yi)：API 20 E 只(zhi)能用(yong)於腸道(dao)細(xi)菌(jun)和或(huo)非(fei)苛(ke)養的(de)革(ge)蘭(lan)陰性(xing)桿菌(jun)。苛(ke)養菌(jun)由(you)於對(dui)營(ying)養(yang)有(you)特殊要求並(bing)且(qie)需要 合(he)適的(de)防(fang)護措(cuo)施(shi)(例(li)如布(bu)魯氏(shi)菌(jun)屬 Brucella 和法(fa)朗西絲菌(jun)屬 Francisella)，這些菌(jun)沒有(you)包(bao)括在(zai) API 20 E 數(shu) 據庫(ku)中。 必(bi)須(xu)采用(yong)其它(ta)方(fang)法(fa)，來排(pai)除(chu)或(huo)確認這些菌(jun)的(de)存(cun)在(zai)。 接(jie)種物的(de)準備 

• 根(gen)據“警(jing)告及註(zhu)意(yi)"壹(yi)欄(lan)所(suo)列方(fang)法(fa)打(da)開(kai)壹(yi)安(an)瓿 API 0.85% NaCl 培養(yang)基(ji)（5mL)或(huo)壹(yi)安(an)瓿 API 懸(xuan)浮(fu)培養(yang)(5  mL), 或(huo)用(yong)含(han) 5mL 0.85 NaCl 鹽(yan)水或(huo)不含(han)添加劑(ji)的(de)無菌(jun)蒸餾(liu)水。

• 用(yong)吸管或(huo) PSIpette 從分(fen)離(li)平(ping)板(ban)上(shang)挑(tiao)取(qu)單(dan)個分(fen)純(chun)菌(jun)落至(zhi)懸(xuan)浮(fu)基(ji)物中。建(jian)議(yi)使用(yong)新(xin)鮮培養(yang)物（18-24 小 時(shi)）。

• 仔(zai)細(xi)研(yan)勻以達(da)到均壹(yi)的(de)細(xi)菌(jun)懸(xuan)液(ye)。 制(zhi)備好(hao)的(de)菌(jun)懸(xuan)液(ye)必(bi)須(xu)立即(ji)使用(yong)。 註(zhu)意(yi)：大多(duo)數(shu)弧菌(jun)（Vibrio)均(jun)嗜鹽(yan)，如懷疑(yi)菌(jun)株為弧菌(jun)，請使用(yong) 0.85% NaCl (5mL)培養(yang)基(ji)。

試(shi)條的(de)接種(zhong) 

• 用(yong)同(tong)壹(yi)根(gen)吸管，將(jiang)菌(jun)懸(xuan)液(ye)加入到試條的(de)小管內(nei)。為避免(mian)在(zai)小管的(de)基底(di)部形成氣泡(pao)，請將試條輕微向前 傾(qing)斜並(bing)把(ba)吸管或(huo)者(zhe) PSI 管(guan)緊(jin)靠小杯(bei)邊(bian)緣加入菌(jun)液(ye)）： 

- CIT、VP 和 GEL 小管，菌(jun)液(ye)需充(chong)滿的(de)管部和杯(bei)部。 

- 其它(ta)管(guan)僅(jin)充(chong)滿管部(不(bu)是杯(bei)部)。 

- 在(zai)試(shi)驗(yan) ADH, LDC, ODC, H2S 和 URE 小杯(bei)內(nei)加入礦物油以形成厭(yan)氧(yang)環(huan)境。

• 蓋(gai)上(shang)培養(yang)盒(he)。於 36℃±2℃孵(fu)育 18~24 小時。

【陽性(xing)判斷(duan)值(zhi)】 

請參考本說明(ming)書(shu)後(hou)的(de)“反(fan)應鑒定(ding)表"，表中(zhong)列出了(le)各種生化反應預期結(jie)果(guo)範圍。

【檢驗(yan)結(jie)果(guo)的(de)解釋(shi)】 

試(shi)條的(de)判讀(du) 

• 孵(fu)育後(hou)，根(gen)據判(pan)讀(du)表表判(pan)讀(du)各(ge)反(fan)應結(jie)果(guo)。

• 如果(guo) 3 個(ge)或 3 個(ge)以上(shang)測(ce)定(ding)（GLU 試(shi)驗(yan)+或(huo)-)為陽性(xing)結(jie)果(guo)，記(ji)錄(lu)所(suo)有(you)自(zi)發(fa)反應於結(jie)果(guo)報(bao)告單上(shang)並(bing)觀(guan)察(cha)需 要 附(fu)加試劑(ji)的(de)試驗(yan)的(de)結(jie)果(guo)：

- TDA 試(shi)驗(yan)：加 1 滴 TDA 試(shi)劑(ji)。深(shen)褐色為陽性(xing)反(fan)應，記(ji)錄(lu)於報告單上(shang)。 

- IND 試(shi)驗(yan)：加 1 滴 JAMES 試(shi)劑(ji)。整個(ge)反(fan)應管出現(xian)粉紅(hong)色者(zhe)為陽性(xing)，記(ji)錄(lu)於報告單上(shang)。 

- VP 試(shi)驗(yan)：加 1 滴 VP 1 和 1 滴 VP 2 試(shi)劑(ji)。至(zhi)少等(deng)待(dai) 10 分(fen)鐘(zhong)，出現(xian)粉紅(hong)或(huo)紅(hong)色者(zhe)表明(ming)為陽性(xing)結(jie)果(guo)， 記(ji)錄(lu)於報告單上(shang)。如淺粉紅(hong)色在(zai) 10 至(zhi) 12 分(fen)鐘(zhong)內出現，判(pan)斷結(jie)果(guo)為陰(yin)性(xing)。 註(zhu)意(yi)：吲(yin)哚(duo)產生試(shi)驗(yan)必(bi)須(xu)最(zui)後(hou)進(jin)行，因(yin)為該(gai)反(fan)應釋(shi)放(fang)的(de)氣體(ti)產(chan)物會千擾試條的(de)其他試驗(yan)。在(zai)加入附加 試(shi)劑(ji)後(hou)，請小心勿(wu)調(tiao)換培養(yang)盒(he)蓋(gai)。

• 如果(guo)加入附加試劑(ji)前陽性(xing)結(jie)果(guo)（包(bao)括 GLU 試(shi)驗(yan)）的(de)數量(liang)少於 3 個(ge)： 

- 重(zhong)新(xin)培養(yang) 24 小時（土(tu) 2 小時），且(qie)不要加任何試(shi)劑(ji)。

- 重(zhong)新(xin)進(jin)行需要加入附加試劑(ji)的(de)試驗(yan)（如前說明(ming)）。 

- 為了(le)完(wan)成鑒(jian)定(ding)，可能(neng)需要進(jin)行補(bu)充(chong)試驗(yan)（參考(kao)有(you)關(guan)鑒定(ding)的(de)段落(luo)）。 解(jie)釋(shi) 鑒(jian)定(ding)結(jie)果(guo)根(gen)據數(shu)值(zhi)編碼(ma)獲(huo)得(de)。 

• 數(shu)值編碼(ma)的(de)確定(ding)： 在(zai)結(jie)果(guo)報(bao)告單，每(mei) 3 個(ge)試驗(yan)為壹(yi)組(zu)，每個(ge)陽性(xing)試驗(yan)分(fen)別(bie)賦予(yu)數(shu)值 1、2 或(huo) 4，在(zai)每(mei)組(zu)中，陽性(xing)反應以相 應的(de)數值(zhi)相加，由(you)此可(ke)得到壹(yi)個(ge) 7 位數字(zi)的(de)編碼(ma)。

氧(yang)化(hua)酶(mei)反應構成第(di) 21 個(ge)試驗(yan)，如陽性(xing)則(ze)賦予(yu)數(shu)值 4。 

• 鑒(jian)定(ding)： 鑒(jian)定(ding)結(jie)果(guo)是根(gen)據數(shu)據庫(ku)（V4.1)得(de)到。 *根(gen)據鑒(jian)定(ding)檢索(suo)手(shou)冊(ce)： 

- 從檢索(suo)手(shou)冊(ce)中查找數(shu)值(zhi)編碼(ma)。 *根(gen)據 apiweb TMM鑒(jian)定(ding)軟件： - 在(zai)鍵盤(pan)上(shang)輸(shu)入(ru) 7 位數字(zi)的(de)數值(zhi)編碼(ma)。 在(zai)某(mou)些(xie)情(qing)況(kuang)下(xia)，7 位數字(zi)的(de)數值(zhi)編碼(ma)還(hai)不(bu)能(neng)區分(fen)細(xi)菌(jun)，必(bi)須(xu)進(jin)行以下(xia)壹(yi)些(xie)補充試驗(yan)來進(jin)壹(yi)步(bu)的(de)鑒定(ding)： 

- 硝酸(suan)鹽(yan)還(hai)原(yuan)到亞硝酸(suan)鹽(yan)(NO2)和氮氣(N2):各(ge)加壹(yi)滴 NIT 1 和 NIT2 試(shi)劑(ji)於葡萄糖(tang)（GLU 管(guan)內，待(dai) 2~3 分(fen) 鐘(zhong)後(hou)，紅(hong)色表示(shi)陽性(xing)結(jie)果(guo)(NO2)。陰(yin)性(xing)反應（黃色）可(ke)能(neng)由(you)於還(hai)原(yuan)至(zhi) N2 (有(you)時(shi)還(hai)有(you)氣泡(pao)）：加 2-3mg 鋅(xin) 粉(fen)到葡萄糖(tang)（GLU)管(guan)，5 分(fen)鐘(zhong)後(hou)，如果(guo)管(guan)保(bao)持(chi)黃色表示(shi)陽性(xing)結(jie)果(guo)(N2)，記(ji)錄(lu)於報告單。如果(guo)變(bian)為橘紅， 則(ze)是陰(yin)性(xing)反應：仍(reng)留在(zai)管(guan)內硝酸(suan)鹽(yan)被鋅(xin)粉還(hai)原(yuan)。該(gai)反(fan)應對(dui)檢測(ce)革(ge)蘭(lan)陰性(xing)、氧(yang)化(hua)酶(mei)陽性(xing)的(de)桿菌(jun)有(you)用(yong)。 

註(zhu)意(yi)：出於和吲(yin)哚(duo)試驗(yan)同(tong)樣的(de)原因(yin)（參(can)考(kao)“試(shi)條的(de)判讀(du)"中(zhong)的(de)註(zhu)意(yi)項），硝酸(suan)鹽(yan)還(hai)原(yuan)試(shi)驗(yan)必(bi)須(xu)最(zui)後(hou)進(jin)行。 

- 動(dong)力（MOB):接(jie)種壹(yi)安(an)瓿 APIM 培養(yang)基(ji)（參見(jian)產(chan)品(pin)說明(ming)書(shu)）