梅(mei)裏埃(ai) API20NE非(fei)苛(ke)養(yang)非(fei)腸(chang)道革蘭氏(shi)陰(yin)性(xing)桿(gan)菌鑒定(ding)試劑盒(he)說明(ming)書(shu)

非(fei)苛養非腸(chang)道革蘭氏(shi)陰(yin)性(xing)桿(gan)菌鑒定(ding)試劑盒(he)（比(bi)色法）說明(ming)書(shu) 

【產(chan)品(pin)名(ming)稱】 通(tong)用(yong)名稱：非苛(ke)養(yang)非(fei)腸(chang)道革蘭氏(shi)陰(yin)性(xing)桿(gan)菌鑒定(ding)試劑盒(he)（比(bi)色法） 

英(ying)文(wen)名(ming)稱：API 20 NE 

【包裝(zhuang)規(gui)格】 25 測(ce)試/盒(he) 

【預期用(yong)途】 該(gai)產(chan)品(pin)用(yong)於(yu)非苛養(yang)、非腸道革蘭陰性(xing)桿(gan)菌的鑒(jian)定。 該(gai)產(chan)品(pin)用(yong)於(yu)鑒定非(fei)苛養、非腸道革蘭陰性(xing)桿(gan)菌（如假單胞菌屬(shu)、不動(dong)桿(gan)菌屬(shu)、黃(huang)桿菌屬(shu)、莫拉(la)菌屬(shu)、弧菌屬(shu) 和氣(qi)單(dan)胞菌屬(shu)等）的(de)標(biao)準(zhun)鑒(jian)定系(xi)統(tong)，包括 8 個常規(gui)試驗、12 個同化(hua)試驗和 1 個數(shu)據(ju)庫(ku)。 

【檢驗原理(li)】 API 20 NE 試劑條(tiao)由裝(zhuang)有脫水(shui)底物的 20 個微型(xing)管構(gou)成。常規(gui)試驗接種重(zhong)溶培養基(ji)的鹽(yan)水(shui)細(xi)菌懸液。在(zai) 培(pei)養過(guo)程中(zhong)，代謝產(chan)生顏色變化(hua)，此(ci)變(bian)化可為自發或通過(guo)加(jia)入試劑顯(xian)示。同化(hua)試驗接種培養基(ji)，如果(guo)它 們能夠(gou)使(shi)用(yong)相應的底物，則細(xi)菌生長(chang)。依照讀(du)數(shu)表(biao)讀取(qu)反應，通過(guo)參考(kao)分(fen)析曲線指(zhi)標(biao)或(huo)使用(yong)鑒別軟件(jian)得(de)到(dao)鑒 別(bie)。

【主(zhu)要組(zu)成成分】 試劑盒(he)組(zu)成(25 種實驗) - 25 個 API 20 NE 試劑條(tiao) - 25 個孵(fu)育盒(he) - 25 安瓿 API AUX 培(pei)養基(ji) - 25 張結(jie)果單 試劑條(tiao)成分 在(zai)本(ben)說明(ming)書(shu)的判(pan)讀表(biao)中(zhong)，給(gei)出了 API 20 NE 試劑條(tiao)的組(zu)成。

需要但沒有提供(gong)的(de)試劑和材(cai)料 試劑 - API NaCl 0.85 %培(pei)養(yang)基(ji), 2 mL (Ref. 20 070) - 試劑 JAMES (Ref. 70 542) NIT 1 + NIT 2 (Ref. 70 442)  Zn (Ref. 70 380) - 氧(yang)化(hua)酶(mei) (Ref. 55 635*) * 參照品(pin)未(wei)在某些國家(jia)出售(shou)：采(cai)用(yong)同等(deng)試劑。 IVD非(fei)苛(ke)養(yang)非腸道革蘭氏(shi)陰(yin)性(xing)桿(gan)菌鑒定(ding)試劑盒(he)（比(bi)色法） 版(ban)本(ben)號 07615K - zh –2009/11 2 - 礦(kuang)物油 (Ref. 70 100) 材(cai)料 - 移液管或(huo) PSIpetter - 安瓿保(bao)護器 - 安瓿架 - 壹般微生(sheng)物實驗室(shi)設(she)備(bei) 

【儲存條(tiao)件(jian)及(ji)有效期(qi)】 2~8℃儲存，有效期(qi)為 12 個月。

生(sheng)產(chan)日期(qi)：詳(xiang)見外(wai)包盒(he)標(biao)簽(qian)。

有效期(qi)至：詳見(jian)外(wai)包盒(he)標(biao)簽(qian)。 

【適用(yong)儀(yi)器(qi)】 - 麥氏(shi)標(biao)準(zhun)比(bi)濁(zhuo)管 (Ref. 70 900) No. 0.5 - API 20 NE 分析鑒定系(xi)統(tong) (Ref.20 090) 或(huo) apiweb™鑒定軟件(jian) (Ref.40 011) (咨詢(xun)生(sheng)物梅裏埃(ai)) 

【樣(yang)本(ben)要求(qiu)】 API 20 NE 不直(zhi)接用(yong)於(yu)臨床或(huo)其(qi)他標(biao)本(ben)。 按(an)照標(biao)準(zhun)微生(sheng)物學技術，必須首先(xian)在適合(he)的培(pei)養(yang)基(ji)（如胰蛋(dan)白酶(mei)解酪蛋(dan)白）上(shang)分離要鑒定的微生(sheng)物。 

【檢驗方(fang)法(fa)】 氧(yang)化(hua)酶(mei)試驗 必須按照生(sheng)產(chan)商的使(shi)用(yong)說明(ming)，進行(xing)氧(yang)化酶(mei)試驗。應當在結(jie)果(guo)單上記(ji)錄(lu)結(jie)果(guo)，因(yin)為它是(shi)最後(hou)圖譜的(de)壹(yi)個有 機部(bu)分(fen)（第(di) 21 個鑒定(ding)試驗）。

菌落(luo) API 20 NE 只(zhi)應用(yong)於(yu)不屬(shu)於(yu)腸桿菌科的(de)非苛(ke)養(yang)革(ge)蘭(lan)陰性(xing)桿菌。 註 1：有些非腸(chang)道的革蘭陰(yin)性(xing)桿(gan)菌亦為氧化(hua)酶陰(yin)性(xing)（嗜(shi)麥芽(ya)黃(huang)單胞菌、不動(dong)桿(gan)菌…）。這些微生(sheng)物也(ye)可以(yi) 用(yong) API 20 NE 鑒(jian)定，但必須根據其(qi)它(ta)細(xi)菌學或(huo)臨床(chuang)標(biao)準(zhun)加(jia)以(yi)選擇。 註 2：對(dui)營(ying)養(yang)要求(qiu)多(duo)或需(xu)要適當處理(li)註意事(shi)項(xiang)的苛養微生(sheng)物（如布(bu)魯(lu)氏(shi)菌和弗(fu)朗(lang)西絲(si)氏(shi)菌），未(wei)包含在(zai) API  20 NE 的數(shu)據(ju)庫(ku)內(nei)。必須采(cai)用(yong)其(qi)他方(fang)法(fa)排(pai)除或證(zheng)實它(ta)們(men)的存(cun)在。

試條的(de)準(zhun)備(bei) 準(zhun)備(bei)壹個培養(yang)盒(he)、盤和蓋子(zi)，向(xiang)盤的(de)底部(bu)倒(dao)入約(yue) 5mL 蒸餾(liu)水(shui)或去離子水(shui)【或任(ren)何不含(han)添(tian)加(jia)劑或(huo)可能釋(shi)放(fang) 氣體（如氯氣、二(er)氧化(hua)碳(tan)等(deng)）的化學(xue)物的水(shui)】，創造(zao)壹(yi)種濕氣。在盤的(de)邊緣部(bu)分(fen)記(ji)錄(lu)標(biao)本(ben)編(bian)號。（不要在蓋上(shang) 記(ji)錄(lu)編(bian)號，因為在操作(zuo)期間它可能錯(cuo)位。）從各個包裝(zhuang)中(zhong)取(qu)出試劑條(tiao)。將試劑條(tiao)放入培養盒(he)中(zhong)。

接種物的準(zhun)備(bei) 

 按照本(ben)產(chan)品(pin)說明(ming)書(shu)“警告(gao)和註意事(shi)項(xiang)"段落(luo)所(suo)示，打(da)開壹(yi)安(an)瓿 API NaCI 0.85 %培(pei)養基(ji)（2 mL），或使(shi) 用(yong)含 2 mL 不含(han)添(tian)加(jia)劑的(de) 0.85 %生理(li)鹽(yan)溶液。

 使用(yong)吸管或(huo)滴管，通(tong)過(guo)抽吸(xi)或(huo)通(tong)過(guo)連續(xu)接觸，從(cong)瓊(qiong)脂(zhi)糖培養(yang)基(ji)上挑(tiao)取(qu) 1 - 4 個形(xing)態(tai)相同的(de)克(ke)隆(long)。建(jian)議(yi) 使用(yong)早期培(pei)養物（18 - 24 小時）。

 配制(zhi)混(hun)懸(xuan)液至濁度(du)等(deng)於(yu) 0.5 McFarland。此(ci)混(hun)懸液在(zai)配制(zhi)後(hou)必須立(li)即(ji)使用(yong)。 註：調整接種物密度(du)至 0.5 McFarland 非常(chang)重(zhong)要；否則 API 20 NE 試劑條(tiao)試驗可能不能(neng)正(zheng)確發(fa)揮(hui)功能。 特別是(shi)，較(jiao)弱的(de)接種物可能導(dao)致假陰性(xing)結果(guo)。在(zai)操作(zuo)試劑條(tiao)的過(guo)程中(zhong)，不要接觸反(fan)應杯，接種後(hou)不要將試劑 條(tiao)長(chang)時(shi)間暴露(lu)空氣(qi)。 

試條的(de)接種非(fei)苛(ke)養(yang)非腸道革蘭氏(shi)陰(yin)性(xing)桿(gan)菌鑒定(ding)試劑盒(he)（比(bi)色法） 版(ban)本(ben)號 07615K - zh –2009/11 3

 用(yong)同壹(yi)根吸管將(jiang)鹽(yan)水(shui)混懸(xuan)液加(jia)到(dao)試驗管（不是(shi)反應杯），接種試驗 NO3到(dao) PNPG。將試劑條(tiao)稍(shao)前(qian)傾(qing)，將吸(xi) 管或(huo)滴管的(de)頂(ding)部(bu)靠(kao)在杯的側(ce)面(mian)，以(yi)避(bi)免(mian)管的(de)底部(bu)形(xing)成氣泡。 

 按(an)照“警告(gao)和註意事(shi)項(xiang)"中(zhong)所(suo)示，打(da)開 1 個 API AUX 培養(yang)基(ji)安瓿，向安(an)瓿加(jia)入約(yue) 200  L 剩余的鹽(yan)混懸(xuan)液。 用(yong)吸管混(hun)勻，避(bi)免(mian)形(xing)成氣泡。

 用(yong)混懸液註滿由 GLU 至 PAC 試驗管和杯。當心液面(mian)必是(shi)平的(de)或稍(shao)凸(tu)，不能(neng)呈(cheng)凹或新(xin)月形(xing)。杯子裝(zhuang)得不 滿或過(guo)滿可能給(gei)出不正(zheng)確(que)的結(jie)果(guo)。

 向(xiang) 3 個下劃(hua)線試驗（GLU、ADH 和 URE）的杯子加(jia)礦(kuang)物油，直(zhi)至形(xing)成凸(tu)出的新(xin)月形(xing)。

 蓋上(shang)培(pei)養盒(he)，在(zai) 29°C ± 2°C 培(pei)養 24 小時（± 2 小時）。 【陽(yang)性判(pan)斷(duan)值(zhi)】 對(dui)於(yu)不同生(sheng)化反(fan)應預期(qi)結果(guo)的(de)範(fan)圍，查閱(yue)本(ben)說明(ming)書(shu)末尾的鑒別(bie)表(biao)。 【檢驗結果的(de)解釋(shi)】 讀取(qu)試劑條(tiao)

 孵(fu)育期(qi)後(hou)，通過(guo)參閱(yue)判(pan)讀表(biao)，判(pan)讀試劑條(tiao)。 

 在(zai)結果(guo)單上記(ji)錄(lu)所(suo)有自發反應（GLU、ADH、URE、ESC、 GEL 和 PNPG）。

 為保(bao)護同化(hua)反應免(mian)受(shou)空氣播散(san)的(de)汙染(ran)，應當進行(xing)兩(liang)個試驗 NO3 和 TRP 的判(pan)讀。要做這壹(yi)點，在(zai) NO3 和 TRP 試驗判(pan)讀期(qi)間，用(yong)培養盒(he)蓋子(zi)遮(zhe)蓋同化(hua)反應。 

 NO3試驗： - 各加(jia)壹滴 NIT1 和 NIT2 試劑至 NO3杯。 - 5 分鐘後(hou)，紅色表(biao)示陽(yang)性反應，記(ji)錄(lu)在(zai)報(bao)告(gao)單(dan)上。 - 由(you)於(yu)氮氣的(de)產(chan)生（表(biao)現為存在(zai)小氣泡）有可能引(yin)起(qi)陰性(xing)反應：加(jia) 2~3 mg Zn 試劑到(dao) NO3杯中(zhong)。 - 5 分鐘(zhong)後(hou)，保(bao)持無(wu)色的杯子表(biao)明陽(yang)性反應，記(ji)錄(lu)在(zai)報(bao)告(gao)單(dan)上。如果杯子變為粉(fen)紅色，反應為陰性(xing)，因為管 中(zhong)存在硝(xiao)酸(suan)鹽(yan)，被鋅(xin)還原為亞(ya)硝(xiao)酸(suan)鹽(yan)。 用(yong)於(yu)細(xi)菌鑒定(ding)的反(fan)應是(shi)硝(xiao)酸(suan)鹽(yan)還原。當上述二(er)個反應（產(chan)生 NO2或(huo) N2）中(zhong)的任(ren)何壹個為陽性(xing)時，硝(xiao)酸(suan)鹽(yan) 還原反(fan)應為陽性(xing)。 但是(shi)，N2的產(chan)生則(ze)可單獨(du)用(yong)作(zuo)補充試驗（參閱(yue)分(fen)析(xi)圖(tu)譜索(suo)引(yin)）。 

 檢測(ce)： 加(jia) 1 滴 JAMES 試劑。立(li)即(ji)發生(sheng)反(fan)應：全杯出現粉(fen)紅色表(biao)明陽(yang)性結果，記(ji)錄(lu)在(zai)結(jie)果(guo)單(dan)上(shang)。

 同化(hua)試驗：觀(guan)察(cha)細(xi)菌生長(chang)。不透明(ming)杯子表(biao)明陽(yang)性反應。 偶爾(er)，1 個杯子顯示為弱生(sheng)長。在(zai)這(zhe)種情(qing)況(kuang)，通過(guo)與試劑條(tiao)上的(de)其(qi)他試驗強(qiang)度(du)比(bi)較(jiao)，結果(guo)應當記(ji)錄(lu)為 或 ±。 

註意: 壹旦進行(xing)了(le)上述判(pan)讀，如(ru)“解釋"段(duan)落(luo)中(zhong)所(suo)示，鑒(jian)定是(shi)可能的(de)。在(zai)下列(lie)情(qing)況(kuang)，必須重(zhong)新(xin)孵(fu)育： - 無(wu)區別 - 無法接受或(huo)可疑的(de)圖(tu)譜； - 如(ru)果(guo)對(dui)獲得的圖(tu)譜標(biao)註了(le)以(yi)下備註： 在(zai) 48 小時孵(fu)育前(qian)鑒定(ding)是(shi)無效的(de) 使(shi)用(yong)習慣或(huo)滴管，通(tong)過(guo)抽吸(xi)吸(xi)走 NIT 1、NIT 2 和 JAMES 試劑，立(li)即(ji)用(yong)礦(kuang)物油掩(yan)蔽(bi)試驗 NO3和 TRP，以(yi)便(bian)形(xing) 成凸(tu)的新(xin)月形(xing)。在 29°C ± 2°C 重(zhong)新(xin)孵(fu)育 24 小時，除了只(zhi)應在 24 小時判(pan)讀的(de)前(qian) 3 個試驗（NO3、TRP 和 GLU）， 其(qi)余試驗再(zai)讀(du)壹次結果。 

說明(ming)： 采(cai)用(yong)數(shu)字(zi)譜獲得鑒定(ding)。

 測(ce)定使(shi)用(yong)率(lv)： 在結果(guo)表(biao)上，將(jiang)結果分成 3 組(zu)，每(mei)組(zu)標(biao)記(ji)為編(bian)號 1、2 或 4。在(zai)每(mei)組(zu)內加(jia)陽性(xing)反應相應的數(shu)字(zi)，得(de)到(dao)壹個 7 位數(shu)；氧(yang)化(hua)酶(mei)反(fan)應構成第(di) 21 個反應，如果(guo)為陽性(xing)則數(shu)值(zhi)為 4。 

 鑒(jian)定(ding)：非(fei)苛(ke)養(yang)非腸道革蘭氏(shi)陰(yin)性(xing)桿(gan)菌鑒定(ding)試劑盒(he)（比(bi)色法） 版(ban)本(ben)號 07615K - zh –2009/11 4 這(zhe)采(cai)用(yong)數(shu)據(ju)庫(ku)（V7.0）進行(xing) * 棒(bang)狀(zhuang)桿菌鑒定(ding)用(yong)編(bian)碼冊 - 查找圖譜中(zhong)的數(shu)字(zi)譜。 * 采(cai)用(yong) apiweb™鑒(jian)定軟件(jian) - 通過(guo)鍵(jian)盤手(shou)動輸(shu)入 7 位數(shu)的(de)數(shu)字(zi)譜。