丹麥(mai)SSI沙(sha)門(men)診(zhen)斷(duan)血清試(shi)劑(ji)盒

丹麥(mai)SSI沙(sha)門(men)診(zhen)斷(duan)血清試(shi)劑(ji)盒檢測步(bu)驟：

1、核(he)酸提取(qu)        

加熱法：刮取(qu)至少10個(ge)菌(jun)落(luo)，懸浮(fu)於100μL的(de)無(wu)菌(jun)水(shui)中(zhong)，漩渦震蕩10s（如果(guo)菌(jun)落(luo)未能均勻分(fen)散，可(ke)適當(dang)延(yan)長震蕩時(shi)間），95℃或沸(fei)水(shui)浴(yu)5min，冷(leng)卻(que)至室(shi)溫，12000rpm離(li)心(xin)5min，吸(xi)取(qu)上(shang)清。

試(shi)劑(ji)盒法：可(ke)使用(yong)商(shang)品(pin)化(hua)的試(shi)劑盒(he)提取(qu)沙(sha)門氏菌(jun)的基(ji)因組(zu)DNA。

2、反(fan)應(ying)體(ti)系配置

從試劑(ji)盒中(zhong)取出預混液(ye)，充分(fen)融(rong)化(hua)，渦旋後短(duan)暫離心(xin)，取(qu)22.5μL置(zhi)於PCR管(guan)或PCR板中，然後各取模(mo)板2.5μL分(fen)別(bie)加入PCR管(guan)或PCR板中（每種(zhong)模(mo)板要(yao)使用(yong)十二種(zhong)預混液(ye)），蓋(gai)好管(guan)蓋(gai)或板膜(mo)，短(duan)暫離心(xin)，立即(ji)進行PCR擴(kuo)增(zeng)反(fan)應(ying)。

3、PCR擴(kuo)增(zeng)       

PCR管(guan)或PCR板置於PCR儀上，推薦反(fan)應(ying)程(cheng)序(xu)設定(ding)如下：反(fan)應(ying)體(ti)系為25μL，在(zai)第二步(bu)每個(ge)循環(huan)60℃時(shi)檢測熒光信(xin)號，檢測通(tong)道(dao)選(xuan)擇(ze)FAM、HEX（VIC）、CY5。