梅(mei)裏(li)埃(ai)API 50CHB G+芽胞桿(gan)菌(jun)鑒定(ding)試劑(ji)盒

梅(mei)裏(li)埃(ai)API 50CHB G+芽胞桿(gan)菌(jun)鑒定(ding)試劑(ji)盒

包(bao)裝規格  10 測試/盒

檢(jian)驗(yan)原理(li)  API 50 CH 試條由 50 個微(wei)量(liang)孔(kong)組成(cheng)，用以(yi)研究碳水化(hua) 合物及其衍生物（heterosides，多(duo)元醇，糖(tang)醛酸）底物 的發(fa)酵(jiao)。用 API 50 CHB 培養(yang)基接種(zhong)試條，使底物水解， 然後檢(jian)測發(fa)酵(jiao)試驗。 試條孵育過程(cheng)中，試條上(shang)的小(xiao)管(guan)內(nei)在(zai)厭(yan)氧(yang)環境(jing)下(xia)產(chan)酸， pH 改(gai)變(bian)而使培養(yang)基中指(zhi)示劑(ji)顏色變(bian)化，由此可(ke)觀(guan)察(cha)到 發(fa)酵(jiao)作(zuo)用。試條上(shang)第(di)壹孔(kong)中不含任(ren)何(he)活性(xing)成(cheng)分，以(yi)此作(zuo) 為(wei)陰性控制。

試劑(ji)盒組成  

API 50CH 試條 10條(tiao)

培養(yang)盒 10個(ge)

結果(guo)報(bao)告單 10張(zhang)

API 50CHB 產(chan)品說(shuo)明書(shu) 1份

API 50CHB 操作(zuo)指(zhi)引(yin)卡(ka) 1張

懸浮液(ye)（2mL） 10安瓿

芽孢桿(gan)菌(jun)培養(yang)基（50CHB Medium） 10安瓿

2 號(hao)麥氏比(bi)濁(zhuo)管(guan) 1瓶

試條的成(cheng)分(fen)及其儲存(cun)條件  API 50CHB 試條在(zai)有效期(qi)（有效期(qi)標在(zai)試劑(ji)盒上）內(nei)， 應貯存(cun)於(yu) 2-8℃。

檢(jian)驗方(fang)法(fa)  

1. 菌(jun)株培(pei)養(yang) 

 檢查(zha)菌(jun)株純度(du) 

 在適宜的固(gu)體培養(yang)基上(shang)培養(yang)菌(jun)株。如菌(jun)株生長過(guo)於(yu) 緩慢(man)，應該用兩個(ge)平板(ban)經行(xing)培養(yang)，以(yi)保(bao)證足(zu)夠(gou)的菌(jun) 量(liang)用於(yu)下(xia)列操(cao)作(zuo)。 

 菌(jun)株培(pei)養(yang)條件： 低溫(wen)菌(jun)：20℃培養(yang) 18-48 小時(shi)； 中溫(wen)菌(jun)：25℃培養(yang) 16-18 小時(shi)； 高溫(wen)菌(jun)：55℃培養(yang) 12-16 小時(shi)； 如不知測定(ding)菌(jun)的最(zui)佳(jia)培(pei)養(yang)條件，請(qing)用多(duo)個(ge)平(ping)板(ban)在不 同溫(wen)度下(xia)培養(yang)。

2. 試條的準(zhun)備 

 準(zhun)備壹個培(pei)養(yang)盒（盤和蓋(gai)子），倒入(ru)約(yue) 10ml 蒸(zheng)餾 水（不含其他(ta)雜質或 Cl2，CO2 揮發(fa)性(xing)氣(qi)體的水） 於盤的蜂(feng)窩小凹(ao)中，造成(cheng)壹個濕(shi)室(shi)。

 在盤的沿(yan)邊(bian)寫(xie)上(shang)菌(jun)株號(hao)(不要(yao)寫(xie)在(zai)蓋(gai)上(shang)，以(yi)免錯放)。

 從包(bao)裝袋(dai)中取出(chu) 2 個試條（0-19，20-39），再把它(ta) 們(men)分(fen)為(wei) 4 個小(xiao)試條（0-9，10-19，20-29，30-39）並 全部放在孵育盒底盤中。取出(chu)另(ling)壹個小(xiao)試條（40-49） 放在孵育盒底盤中上(shang)述(shu) 4 個試條的後(hou)面，即(ji)完(wan)成(cheng)試 條的準(zhun)備。

3. 接種(zhong)物的準(zhun)備 

 使用棉(mian)試子從固(gu)體培養(yang)基上(shang)收(shou)集菌(jun)株，加(jia)入(ru)至(zhi)懸 浮液(ye)中，制成高濃(nong)度(du)菌(jun)懸液（S）。 

 往(wang)0.85%NaCl（5mL）中加(jia)入(ru)高(gao)濃(nong)度(du)菌(jun)懸液（S）， 制備成濁(zhuo)度(du)相(xiang)當(dang)於(yu)2McF 的菌(jun)懸液，記錄滴數(shu) n。 

 打開(kai) 50CHB 培養(yang)基安瓿，加(jia)入(ru) 2n 滴上述菌(jun)液接種(zhong)。 

 所(suo)制備的菌(jun)懸液應立(li)即(ji)使用。

4. 試條接種(zhong) 

用無菌(jun)加(jia)樣(yang)器(qi)按下(xia)述要(yao)求(qiu)將(jiang)菌(jun)懸液加(jia)到試條上(shang)的 50 個 管(guan)中： 

 將孵育盒底盤向前輕輕傾(qing)斜(xie)。 

 使加(jia)樣(yang)器(qi)頭(tou)靠(kao)在(zai)杯的邊(bian)緣(yuan)加(jia)入(ru)菌(jun)懸液，避(bi)免(mian)產(chan)生氣 泡。 

 僅加(jia)滿管(guan)的部分(fen)，管(guan)的上(shang)部（杯）不要(yao)加(jia)菌(jun)懸液， 這樣(yang)管(guan)內(nei)可(ke)保(bao)持厭(yan)氧(yang)環境(jing) 

 當(dang)菌(jun)懸液接種(zhong)完(wan)成(cheng)後，液面應避免(mian)出(chu)現(xian)新月形的凹(ao) 陷或凸(tu)起(qi)。 

 根據(ju)被(bei)檢細菌(jun)的生長需(xu)要(yao)，將(jiang)試條放在適當(dang)的溫(wen)度 進(jin)行(xing)孵育：30°C/37°C 培養(yang) 48h 或 55°C 培養(yang) 24h。 如果(guo)最(zui)適溫(wen)度不詳(xiang)，則培(pei)養(yang)在中溫(wen)情況。

5. 判讀(du)試條 

 根據(ju)細菌(jun)和所(suo)研究反(fan)應的類(lei)型(xing)，在(zai)達(da)到了規定(ding)的孵 育時間(jian)後(hou)(如 24 小時(shi)，48 小時(shi))，二(er)次判(pan)讀(du)試條。

— 低溫(wen)菌(jun)：培養(yang) 48 和 96 小時(shi)； 

— 中溫(wen)菌(jun)：培養(yang) 24 和 48 小時(shi)； 

— 高溫(wen)菌(jun)：培養(yang) 24 小時(shi)； 對(dui)生長較快(kuai)的高(gao)溫(wen)菌(jun)必須(xu)培(pei)養(yang) 3或6 小時(shi)後(hou)讀， 因為(wei)培養(yang) 2 小時(shi)後(hou)判讀不好解釋。  以(yi)陽性（+），陰性（－），可(ke)疑（？）來(lai)解釋每(mei) 壹個試驗，將(jiang)結(jie)果(guo)記錄在(zai)結(jie)果(guo)記錄單上(shang)。 

 陽性反(fan)應：酸化(hua)，由於(yu)培(pei)養(yang)基所(suo)含酚(fen)紅(hong)變(bian)黃(huang)而呈(cheng)現(xian) 黃(huang)色；七葉(ye)靈測定(ding)（第(di) 25 號(hao)管(guan)）由紅色變(bian)成黑(hei)色， 為(wei)陽性。

 偶爾會(hui)出(chu)現(xian)第(di)二(er)次讀(du)條(tiao)時(shi)陽性結(jie)果(guo)變(bian)為(wei)陰性，這是(shi) 因為(wei)從蛋白腖(dong)產(chan)氨(an)中和(he)所(suo)產(chan)酸而(er)導(dao)致，這些結(jie)果(guo)應 被記錄為(wei)陽性。 

鑒(jian)定(ding) 

以(yi)陽性（+），陰性（－），可(ke)疑（？）來(lai)解釋每(mei)壹個 試驗，將(jiang)結(jie)果(guo)記錄在(zai)結(jie)果(guo)記錄單上(shang)。 

鑒定(ding)：使用鑒定(ding)軟件 APIweb： 在鍵(jian)盤上輸(shu)入(ru) 50 個生化反(fan)應結果(guo)。可(ke)得以(yi)下(xia)信息(xi)： 

— 被鑒(jian)定(ding)細菌(jun)的種(zhong)名 

— 鑒定(ding)%越接近 100%，T 值越(yue)接近 1，鑒定(ding)結果(guo)越(yue)好。

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