梅(mei)裏埃腸桿菌科和革蘭氏(shi)陰性(xing)桿菌鑒(jian)定(ding)試劑盒(he)（API 10 S）說(shuo)明書(shu)

腸桿菌科和其(qi)它(ta)非苛養革蘭氏(shi)陰性(xing)桿菌鑒(jian)定(ding)試劑盒(he)（比(bi)色法(fa)）

說明(ming)書(shu)

【產品(pin)名稱(cheng)】

通用(yong)名稱(cheng)：腸桿菌科和其(qi)它(ta)非苛養革蘭氏(shi)陰性(xing)桿菌鑒(jian)定(ding)試劑盒(he)（比(bi)色法(fa)）

英文名(ming)稱(cheng)：API 10 S

【包裝(zhuang)規(gui)格(ge)】

50 測(ce)試(shi)/盒

【預期(qi)用(yong)途】

用(yong)於(yu)來源於(yu)人(ren)體並(bing)經過(guo)分(fen)離(li)培養的腸桿菌科和其(qi)它(ta)非苛養革蘭氏(shi)陰性(xing)桿菌的鑒定(ding)。

該(gai)產品(pin)用(yong)於(yu)可導(dao)致腹(fu)瀉(xie)、血流(liu)感(gan)染、尿(niao)路(lu)感(gan)染等(deng)的腸桿菌科和其(qi)它(ta)非苛養革蘭氏(shi)陰性(xing)桿菌的鑒定(ding)，臨床(chuang)常(chang)見(jian)

樣本來源有糞(fen)便、直腸拭(shi)子、尿(niao)、血等(deng)。

【檢驗(yan)原理】

API 10 S 試(shi)驗(yan)條(tiao)由 10 個(ge)含有幹燥底物的微(wei)量(liang)小管組(zu)成。這些測(ce)定(ding)是用(yong)菌懸(xuan)液(ye)接(jie)種和復(fu)溶培養基(ji)。孵(fu)育(yu)過(guo)程(cheng)

中，所(suo)產(chan)生的最終(zhong)代謝產物通過(guo)自(zi)然(ran)反(fan)應(ying)或(huo)加(jia)入(ru)附加(jia)試劑(ji)而(er)變(bian)色。鑒定結果(guo)可(ke)根(gen)據說明(ming)書(shu)的判讀(du)表(biao)進(jin)行讀(du)出(chu)，

也可(ke)參(can)照(zhao)生化譜(pu)檢索手冊或鑒定(ding)軟件，得到(dao)鑒定(ding)結果(guo)。

【主(zhu)要(yao)組(zu)成成分(fen)】

試(shi)劑(ji)盒(he)組(zu)成(用(yong)於(yu) 50 個(ge)測(ce)試(shi))

- 50 個(ge) API 10 S 試(shi)條(tiao)

- 50 個(ge)孵(fu)育(yu)盒(he)

- 50 張(zhang)結果(guo)報(bao)告單(dan)

- 1 個(ge) 封(feng)口(kou)夾

試(shi)劑(ji)條成(cheng)分(fen)

API 10 S 試(shi)條(tiao)的成分(fen)請(qing)參(can)閱(yue)說明(ming)書(shu)後(hou)的結果(guo)判讀(du)表(biao)。

需(xu)要(yao)但沒有提(ti)供的試劑(ji)和設(she)備(bei)

試劑(ji)/儀(yi)器

- API NaCl 0.85 % 培養基(ji) 5 mL（產品(pin)號. 20 230）或(huo) API 菌懸(xuan)液(ye)培養基(ji), 5 mL（產品(pin)號. 20 150）

- 試(shi)劑：TDA （產品(pin)號. 70 402）

- JAMES （產(chan)品(pin)號. 70 542）

- NIT 1 + NIT 2 （產(chan)品(pin)號. 70 442）

- 氧(yang)化酶(mei) （產品(pin)號. 55 635*）

* 某(mou)些國(guo)家不銷(xiao)售(shou)，請用(yong)相同功能(neng)試(shi)劑(ji)代替

- 礦物油(you) （產(chan)品(pin)號. 70 100）

材(cai)料(liao)

- 吸管或 PSI 管

- 安(an)瓿保(bao)護套(tao)

- 安(an)瓿架

- 微(wei)生物實驗(yan)室(shi)常(chang)規設(she)備(bei)

【儲存(cun)條件及有效(xiao)期】

2～8℃保(bao)存，有(you)效(xiao)期為(wei) 18 個(ge)月(yue)。

API 10 S 試(shi)條包裝(zhuang)於(yu)含幹燥劑的密(mi)封(feng)鋁箔(bo)袋中。壹旦打(da)開(kai)（*），未用(yong)完(wan)試條用(yong)密(mi)封(feng)夾（包含在試劑(ji)盒(he)中）將(jiang)包裝(zhuang)袋重(zhong)新(xin)密(mi)封(feng)，2～8℃可保(bao)存 10 個(ge)月(yue)有(you)效(xiao)（或至包裝(zhuang)盒(he)上(shang)的有效(xiao)期）。

（*）建議(yi)開(kai)封方法(fa)：在封口(kou)下(xia)方(fang)剪開鋁箔(bo)裝(zhuang)，為(wei)防(fang)止(zhi)意(yi)外損壞(huai)幹(gan)燥劑，開封(feng)時(shi)應(ying)保(bao)持鋁箔(bo)袋垂直。

生產(chan)日(ri)期：詳(xiang)見(jian)外包盒標(biao)簽。

有(you)效(xiao)期至：詳(xiang)見(jian)外包盒標(biao)簽。

【適用(yong)儀(yi)器】

- apiweb TM 鑒(jian)定軟(ruan)件（產品(pin)號 40 011）

- 微(wei)生物實驗(yan)室(shi)常(chang)規設(she)備(bei)。

【樣本要(yao)求】

API 10 S 不能(neng)直(zhi)接(jie)用(yong)於(yu)臨床(chuang)或其(qi)他(ta)標(biao)本（如(ru)如(ru)血樣(yang)、尿樣和糞(fen)樣、直腸拭(shi)子等(deng)等(deng)）。被(bei)鑒定的微(wei)生物必(bi)須(xu)首(shou)先根據標(biao)準的微(wei)生物技術(shu)在適當的培養基(ji)上(shang)進(jin)行分(fen)離(li)。

【檢驗(yan)方(fang)法】

氧(yang)化酶(mei)試驗(yan)

 嚴格(ge)按(an)生產(chan)商(shang)使用(yong)說明(ming)做氧化酶(mei)試驗(yan)並(bing)將(jiang)結果(guo)記錄(lu)在結果(guo)報(bao)告單(dan)上(shang)（第 11 個(ge)鑒(jian)定(ding)試(shi)驗(yan)）。

試(shi)條的準備(bei)

• 準備(bei)壹個(ge)培養盒（盤(pan)和(he)蓋子），倒入(ru)約 5mL 蒸餾水(shui)或(huo)軟化水(shui)【或(huo)其(qi)它(ta)不含任何添加(jia)劑或(huo)能產生揮(hui)發性(xing)氣(qi)體的化學(xue)物質的水（如(ru) Cl2, CO2,等(deng)）】於(yu)盤(pan)的蜂窩(wo)小凹中，造成壹(yi)個(ge)濕(shi)室(shi)。

• 在盤(pan)的長(chang)邊(bian)寫(xie)上(shang)菌株(zhu)編(bian)號(hao)（不要(yao)寫(xie)在蓋子上(shang)，因為(wei)操(cao)作過(guo)程(cheng)中很(hen)容易將(jiang)蓋子放(fang)到(dao)其(qi)它(ta)試條(tiao)上(shang)）。

• 從(cong)包裝(zhuang)袋中取出(chu)試條(tiao)。

• 將(jiang)試條(tiao)放(fang)入(ru)培養盒中。

註：API 10 S 只適用(yong)於(yu)腸桿菌科和/或(huo)非苛養 G－桿菌鑒(jian)定(ding)。對營(ying)養有特(te)殊(shu)要(yao)求並(bing)需(xu)必(bi)要(yao)防護(hu)措施的苛養菌（布(bu)魯氏(shi)菌(jun) Brucella 和弗朗西(xi)絲菌(jun) Francisella）不包括在 API 10 S 數(shu)據庫中，需(xu)用(yong)其(qi)他(ta)方(fang)法鑒定。

接(jie)種物的制備(bei)

• 按(an)照產品(pin)說明(ming)書(shu)中“警告和(he)註(zhu)意(yi)"的相關(guan)部分(fen)，打(da)開(kai)壹(yi)個(ge) API NaCl 0.85%培養基(ji)安(an)瓿（5mL）或壹個(ge) API 懸(xuan)浮培養基(ji)（5mL），或用(yong)不含任何添加(jia)劑的無菌(jun)生理(li)鹽(yan)水或(huo)滅菌蒸餾水(shui)（5mL）。

• 用(yong)吸管或 PSI 管，從(cong)分(fen)離(li)平板上(shang)取單(dan)個(ge)菌(jun)落(luo)。推(tui)薦使用(yong) 18~24 小時培養物。

• 仔細(xi)乳化成(cheng)均(jun)勻(yun)的細(xi)菌懸(xuan)液(ye)。

菌懸(xuan)液(ye)制備(bei)好後(hou)須(xu)立(li)即(ji)使用(yong)。

註 : 大(da)多(duo)數(shu)弧菌屬(shu)嗜(shi)鹽菌。如(ru)懷(huai)疑(yi)為(wei)弧菌，則(ze)應(ying)用(yong) API NaCl 0.85%培養基(ji)制備(bei)菌懸(xuan)液(ye)。

試條的接(jie)種

• 用(yong)同壹只(zhi)吸(xi)管，將(jiang)菌懸(xuan)液(ye)加入(ru)試條(tiao)的管中（為(wei)避(bi)免(mian)在管底形成(cheng)氣(qi)泡(pao)，將(jiang)試條(tiao)輕(qing)微(wei)向(xiang)前傾斜(xie)並(bing)把吸管或 PSI管緊(jin)靠小杯(bei)邊(bian)緣(yuan)以避(bi)免(mian)在管部形成氣(qi)泡(pao)）。

• CITE 試驗(yan)，充滿(man)管和杯(bei)。

• 其(qi)他(ta)試(shi)驗(yan)菌(jun)液只(zhi)加入(ru)管（不加(jia)入(ru)杯(bei)）。

• 在試驗(yan) LDC, ODC, H2S 和(he) URE 小杯(bei)內(nei)加入(ru)礦物油(you)形(xing)成新(xin)月(yue)形(xing)凸起以(yi)保(bao)證厭(yan)氧環境。

• 蓋好培養盒蓋(gai)。

於(yu) 36°C ± 2°C 孵(fu)育(yu) 18～24 小時。

試(shi)條(tiao)的判讀(du)

• 孵(fu)育(yu)後(hou)，根(gen)據結果(guo)判讀(du)表(biao)判讀(du)所(suo)有(you)反應(ying)。

• 記錄(lu)全部結果(guo)於(yu)結果(guo)報(bao)告單(dan)上(shang)。

• 需(xu)加附加(jia)試劑(ji)的試驗(yan)：

- TDA 試(shi)驗(yan)：加(jia)壹滴(di) TDA 試劑(ji)。顯示紅(hong)褐(he)色為(wei)陽性(xing)反(fan)應(ying)。

- IND 測(ce)試(shi)：加(jia)壹(yi)滴 JAMES 試(shi)劑。整(zheng)個(ge)杯(bei)顯粉紅(hong)色(se)為(wei)陽性(xing)反(fan)應(ying)。

- NO2試(shi)驗(yan): 在 GLU 試驗(yan)中各(ge)加入(ru)壹滴(di) NIT 1 和 NIT 2 試(shi)劑，等(deng)待 2 到(dao) 5 分(fen)鐘(zhong)。紅色(se)為(wei)陽性(xing)反(fan)應(ying)。

註(zhu)：硝(xiao)酸(suan)鹽(yan)還原試驗(yan)和(he)吲(yin)哚試(shi)驗(yan)必(bi)須(xu)最後(hou)做，以免(mian)這(zhe)些反(fan)應(ying)釋放的氣(qi)體幹(gan)擾(rao)其(qi)他(ta)試(shi)驗(yan)的結果(guo)判斷(duan)。加完(wan)附加(jia)試劑(ji)後(hou)註(zhu)意(yi)不要(yao)再蓋蓋子。

解(jie)釋

鑒定結果(guo)根(gen)據數(shu)值(zhi)編碼獲(huo)得。

• 數(shu)值(zhi)編碼的確定(ding)：

在結果(guo)報(bao)告單(dan)，每(mei) 3 個(ge)試(shi)驗(yan)為(wei)壹(yi)組(zu)，每組(zu)的陽性(xing)反(fan)應(ying)分(fen)別(bie)賦予 1、2 或(huo) 4 的數(shu)值(zhi)，將(jiang)每組(zu)數(shu)值(zhi)相加得到(dao)壹個(ge) 4位(wei)數(shu)字(zi)的編碼(ma)。

• 鑒定(ding)：

鑒(jian)定(ding)結(jie)果(guo)是根(gen)據數(shu)據庫 (V3.1)得到(dao)。

* 依(yi)據數(shu)值(zhi)編碼：

-從(cong)檢索手冊中查(zha)找(zhao)數(shu)值(zhi)編碼。

* 依(yi)據 apiwebTM 鑒定(ding)軟(ruan)件：

-在鍵盤(pan)上(shang)輸(shu)入(ru) 4 位(wei)數(shu)字(zi)的數(shu)值(zhi)編碼